不久，亚历山大又准备西征，去征服地中海的西半部：北非、意大利、西班牙，不料，在出发的前几天，突然患恶性疟疾，几天后，病魔夺去了他的生命。他年仅33岁，在位13年。
亚历山大的生命虽然短暂，却是有声有色，给历史留下深深印迹。他是一位杰出的军事家和政治家。他率领的马其顿大军风驰电掣，势如破竹，铁蹄踏遍印度河到多瑙河流域，建立起一个横跨欧亚非的空前大帝国。但是这个帝国很不牢固，它只是在亚历山大超强的军事力量下维系在一起，亚历山大死后，他的部将则在这片国土上纷纷建立各自的政权，多沿袭埃及、波斯的传统旧制，如希腊一马其顿、埃及的托勒密王朝、叙利亚等，亚历山大的马其顿帝国烟消云散，希腊的城邦制度不曾在东方留下影响，在其本土，也已成陈迹。
不过，亚历山大的东征带来一个意料之外的后果，就是开拓了比以前远为宽广的东西贸易通路，促进了东西方文化的交流。东西方的艺术、思想、智慧合炉而冶，孕育了公元前4世纪一前l世纪东地中海各地文化和科学技术的昌盛。希腊人学习了在西亚和北非有长久传统的天文学和数学知识；希腊优美的建筑和雕刻也传布到亚非，特别是集中于亚非各国由希腊人所建立的外族王朝的宫廷。因此，近代西方史学上把这一时期称为“希腊化时期”。虽然“希腊化”一词不尽恰当，多少也反映出亚历山大东征在历史上造成的一个重要变化。